说一说：ELISA试剂盒的用途和组成结构

guozhiwei · 发表于 2022-11-5 08:36:51

　　ELISA试剂盒的基础是抗原或者抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或者抗体任然保持其免疫学活性，酶标记的抗原或者抗体即保留其免疫学活性，又保留了酶的活性，在测定时受检标本（测定其中的抗体或者抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他的物质分开。再加入酶标记的抗原或者抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或者定量分析。由于酶的催化效率很高，间接的放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的灵敏度。ELISA可用于测定抗原，也可以用于测定抗体。ELISA试剂盒的组成结构：液质检测一直是行业的佼佼者，在业内好评如潮，备受大众所青睐。

　　一、血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热量和肉毒素的试管。收集血液后，1000*g离心10分钟将血红细胞迅速小心的分离。二、血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。三、细胞上清液：1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。四、组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液。五、保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂盒成分：一、预包被板：抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 96T二、酶标记抗体： (30倍浓缩)HRP标记抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 0.4mL x 1三、标准品：重组小鼠白介素-6 0.5mL x 2四、 EIA缓冲液：含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 30mL x 1五、标记抗体稀释液：含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 12mL x 1六、显色剂： TMB底物液 15mL x 1七、终止液： 1N硫酸 12mL x 1八、浓缩洗涤液： (40倍浓缩) 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 50mL x 1 操作说明 1实验所需器材(但试剂盒没有提供) 酶标仪(450nm) 微移液管及其吸嘴量筒及烧杯去离子水冰箱(4°C) 坐标纸(log/log) 吸水纸试管(用于标准品稀释) 温育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性试剂管(用于浓缩酶标记抗体和显色剂)